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Detalhes do produto:
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| Nome do produto: | Ligase do ADN | 10299ES40: | 40.000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400.000 U | 10299ES83: | 1.600.000 U |
| Toupeira entrada do ADN (pmol): | Entrado ADN) (do ng/[0,66 × entraram o comprimento da média do ADN (o bp)] | Aplicação: | para o uso da pesquisa SOMENTE! |
| Realçar: | 400 ligase do ADN de U/UL T4,Ligase do ADN da pesquisa T4,Reagente bioquímico da ligase do ADN T4 |
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Ligase rápida do ADN T4 (400 U/ΜL)
A ligase rápida do ADN T4 é um único produto da enzima que possa ser usado para conectar fragmentos do ADN e adaptador em processo da construção da biblioteca de NGS. O produto foi verificado pela taxa de transferência alta que arranja em sequência e tem a qualidade excelente. Esta enzima tem uma capacidade de ligação altamente eficiente, que seja muito apropriada para a ligação de fragmentos ácidos nucleicos complexos, tais como o adaptador de Ω da plataforma de MGI. Recomenda-se selecionar o módulo da ligadura do ADN de Hieff NGSTM Ultima (Cat#12604) cujo o componente do núcleo é ligase rápida do ADN T4 para os clientes que não precisam o ajuste do sistema.
| Nome do produto | Cat# | Tamanho |
| Ligase rápida do ADN T4 (400 U/ΜL) | 10299ES40 | 40.000 U |
| 10299ES42 | 400.000 U | |
| 10299ES83 |
1.600.000 U |
Descrição do produto sobre a ligase rápida do ADN T4
A ligase rápida do ADN T4 é um único produto da enzima que possa ser usado para conectar fragmentos do ADN e adaptador em processo da construção da biblioteca de NGS. O produto foi verificado pela taxa de transferência alta que arranja em sequência e tem a qualidade excelente. Esta enzima tem uma capacidade de ligação altamente eficiente, que seja muito apropriada para a ligação de fragmentos ácidos nucleicos complexos, tais como o adaptador de Ω da plataforma de MGI. Recomenda-se selecionar Hieff NGSTMMódulo da ligadura do ADN de Ultima (Cat#12604) cujo o componente do núcleo é ligase rápida do ADN T4 para os clientes que não precisam o ajuste do sistema.
Componentes do produto da ligase rápida do ADN T4
| Número componente | Componentes | Cat#/Size | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Ligase rápida do ADN T4 (400 U/ΜL) | µL 100 | 1 mL | 4 mL |
| 10299-B | 10 amortecedor da ligase do ADN do × T4 | μL 250 | 5 μL do × 500 | 10 mL |
Instruções
1. Os jogos de construção atuais da biblioteca do ADN do grosso da população não são refinados geralmente após o reparo do fim e o tratamento da Um-pedra saliente, e executam diretamente a ligadura do adaptador. Refira por favor a seguinte preparação para o sistema de reação. O redemoinho completamente, gerencie momentaneamente e para incubar para o minuto 15 em 20°C.
| Componentes | Volume (μL) |
| ADN Dinamarca-atado | 60 |
| 10 amortecedor da ligase do ADN do × T4 | 10 |
| PEG 6000 de 50% | 10* |
| Adaptador do ADN | X** |
| Ligase rápida do ADN T4 (400 U/ΜL) | 15*** |
| ddH2O | Até 100 |
[Nota]: o PEG 6000 de *50% não é fornecido no jogo, você precisa de prepará-lo por si próprio.
** Refira a seguinte tabela para a quantidade de adaptador.
O *** a quantidade de ligase rápida do ADN T4 usada pode ser o μL 1-5 adicionado como necessário.
2. A qualidade e a concentração de adaptadores usados diretamente afetam a eficiência da ligadura e o rendimento da biblioteca. Demasiado uso do adaptador pode produzir mais dímero do adaptador, quando um mais baixo uso puder afetar a eficiência da ligadura e o rendimento da biblioteca. A seguinte tabela alista a quantidade recomendada de adaptador usada em situações entradas diferentes do ADN usando este jogo.
| ADN entrado |
Adaptador: ADN entrado (relação do molar) |
ADN entrado |
Adaptador: ADN entrado (relação do molar) |
| 1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
| 500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
| 250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
| 100 ng | 100:1 | página 500 | 400:1 |
[Nota]: Entrado ADN toupeira (pmol) ≈ entra ADN) (do ng/[0,66 comprimentos entrados × da média do ADN (bp)].
Etapa 1: Calcule o número de toupeiras do ADN da entrada. Fórmula: Entrado ADN toupeira (pmol) ≈ entra ADN) (do ng/[0,66 comprimentos entrados × da média do ADN (bp)]; ÷ =100 entrado da toupeira do ADN (pmol) (0.66×300) = 0,5 pmol;
Etapa 2: De acordo com a tabela acima, calcule o número de toupeiras do adaptador adicionadas.; Quando o ADN entrado for 100ng, a relação do molar dos adaptadores: o ADN da entrada é 100:1, e o número de toupeiras do pmol dos adaptadores added=100×0.5 pmol=50;
Etapa 3: Calcule o volume da adição do adaptador. Concentração do adaptador = 15 μmol/L (se você usa o adaptador da outra empresa, você precisa de determinar sua concentração de acordo com suas instruções); O volume de adaptador adicionado = toupeiras do adaptador adicionou (a concentração do ÷ do pmol 50) do adaptador (μL 15 μmol/L) = 3,34 (nota: 15 μmol/L = μL de 15 pmol/);
Em resumo, o volume a que o adaptador pode ser adicionado é o μL 3,4. (Nota: O volume máximo da adição do adaptador não excede o μL 5).
O produto é enviado com blocos de gelo e pode ser armazenado em -20°C por dois anos.
Definição da unidade
Em um sistema de reação da ligadura de 20 μL, quando o μg 6 de λDNA-traseiroⅢ é reagido em 16℃ por 30 minutos, a quantidade de enzima exigida para dar a ligadura mais de 50% dos fragmentos do ADN foi definida como uma unidade (U).
Cuidados
1. A ligase do ADN T4 é sensível à desnaturação física. Ao misturar, inverta delicadamente o tubo e agite-o bem. Não agite vigorosamente;
2. As enzimas devem ser armazenadas em uma caixa de gelo ou em um banho de gelo quando usadas, e devem ser armazenadas em -20°C imediatamente depois do uso;
3. Este produto é para o uso da pesquisa SOMENTE!
4. Para suas segurança e saúde, vista por favor revestimentos do laboratório e luvas descartáveis para a operação.
Se você precisa mais informação sobre esta ligase rápida do ADN T4 (400 U/ΜL), contacte por favor connosco, obrigado
Pessoa de Contato: Ms Kris
Telefone: +8613049739311
